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      組培吧 · 金線蓮!金線蓮組培技術實例分享【附配方】

      導讀:金線蓮Anoectochilusroxburghii(wall.)lindl為蘭科開唇蘭屬多年生草本,其種子自然萌發率和繁殖率低,利用組培技術快速繁殖種苗,對金線蓮的開發利用和野生資源保護具有現實意義。筆者特將對金線蓮組織培養幾種培養基篩選結果報道如下。


      1 材料與方法

      1.1 材料

      取金線蓮幼嫩莖段為外植體。

      1.2 外植體滅菌

      取生長健壯且無病蟲害的金線蓮幼嫩莖段,去葉,放入低濃度的洗衣粉水中漂洗3-5分鐘,然后用自來水沖洗干凈,用75%酒精滅菌3-5秒,用0.1%的升汞滅菌15分鐘,再用無菌水沖洗5-6次,將消毒好的材料切成有1-2節、帶腋芽的莖段,接種在Ar + 6-BA 1.0mg/L + NAA0.5mg/L培養基上(Ar為MS改良培養基,大量元素減半,微量元素加倍),pH5.8,蔗糖2%、瓊脂粉0.7%。

      培養條件:溫度(25±1)℃,光照時間8-10小時/天,光照強度1500-2000lx。

      1.3 不同激素濃度繼代增殖培養基篩選

      將分化出的叢生芽分割轉接到繼代增殖培養基上,培養基Ar + 6-BA 1-4mg/L + NAA0.1-0.8mg/L + IBA 0.2mg/L + KT 0.5mg/L,培養基附加糖3%、瓊脂粉0.7%,pH5.8。培養條件同上。通過改變6-BA和NAA的濃度,共為7個處理(每個處理接種三瓶,每瓶5個接種塊),經繼代增殖培養,篩選培養基的 很佳培養配方。

      1.4 不同添加物壯苗培養基篩選

      將幼苗轉接到壯苗培養基上,培養基Ar加入或不加入10%馬鈴薯、10%香蕉等添加物+糖 3% + AC 0.2%;培養基均加入瓊脂粉0.7%,pH5.8。培養條件同上。試驗設培養基中添加10%馬鈴薯,添加10%香蕉,添加10%馬鈴薯+10%香蕉,不添加馬鈴薯和香蕉(對照)等4種處理,以篩選 很佳添加物壯苗培養基配方。

      1.5 不同激素濃度對生根的影響

      不定芽伸長至3-4厘米時,自基部切下,接種到生根培養基上,培養基為Ar + NAA 0.1-2.0mg/L + IBA 0.2-0.5mg/L + 糖3% + AC 0.2%,培養基均加入瓊脂粉0.7%,pH5.8,共設8個處理,每處理接種5瓶,每瓶接種5株,培養條件同上,以篩選 很佳的生根培養基。

      2 結果與分析

      2.1 不同激素濃度對不定芽繼代增殖的影響

      試驗結果(表1):培養15天時,7種處理有的開始分化出不定芽,60天后7個處理中以處理第6組BA 2.0 + NAA 0.4 + IBA 0.2 + KT 0.5為 很佳,分化出的不定芽為叢生狀,且多達90個小芽,生長粗壯,分化率達100%,增殖倍數6。其次是處理第2組BA 2.0 + NAA 0.2 + IBA 0.2 + KT 0.5,不定芽總數81個,生長粗壯分化率100%,增殖倍數5.4。試驗表明,芽的分化和增殖與BA、NAA濃度有密切關系,一定量的BA、NAA對不定芽有促進分化和增殖的作用。


      2.2 不同添加物對幼苗生長的影響

      培養60天后的觀察結果(表2)表明:添加10%馬鈴薯、香蕉等添加物能顯著地促進幼苗的分化、生長,各項分化、生長指標都明顯高于對照,其中以添加10%馬鈴薯和10%香蕉的分化、生長 很好;其次為添加10%香蕉和10%馬鈴薯的,然而污染率也隨加入添加物而增加,幼苗分化、生長愈好的,污染愈重。


      2.3 生根培養

      當幼苗伸長到3-4厘米高時從基部切下,轉接到生根培養基上。培養60天后的觀察結果(表3)表明:在處理第6組IBA 0.5 + NAA 0.5和處理第7組IBA 0.5 + NAA 1.0的兩種培養基上,12天后開始生根,60天后不定根的生根率達到100%。平均每株苗的根數3.8條或4.0條,不定根平均伸長2.8厘米或3.1厘米,苗生勢粗壯,生長 很好;而處理第1、5組的生根率分別為87%和93%,不定根少,幼苗生勢弱,生長 很差??梢钥闯?,一定量的IBA和NAA對不定根的誘導有促進作用。


      2.4 移栽

      幼苗在生根培養基上培養50-60天,長至5-6厘米時,將瓶苗搬到溫室大棚或陰涼通風處經7-10天的適應性煉苗,便可洗苗移栽。栽培基質以森林腐殖土、河沙、珍珠巖按7 : 2 : 1的比例配制,用1%-2%的多菌靈或高錳酸鉀液噴淋消毒。將生根苗的培養基洗凈,用1%的多菌靈水浸泡10分鐘,晾干,移栽于消毒好的基質上,用無紡布保濕10-15天,移栽成活率可達98%以上。

      3 討論

      a. 金線蓮在繼代增殖培養過程中加入一定量的KT可促進芽的分化和增殖。金線蓮對6-BA不敏感,當培養基中的6-BA濃度達到4mg/L仍未出現畸形苗,但在培養過程中6-BA有積累效應,應根據苗的生勢確定6-BA的用量。對金線蓮的組培快繁的基本培養基、外源激素的濃度和添加物等因素的試驗表明:Ar + 6-BA 2.0 + NAA 0.4+ IBA 0.2 + KT 0.5是適合的繼代增殖培養基;Ar + 糖 3% + AC 2%的培養基添加10%香蕉和10%馬鈴薯能顯著促進幼苗的分化和生長;Ar + IBA 0.5+NAA 0.5 +糖 2% + AC 0.2%是適于生根的培養基。

      b. 金線蓮煉苗時,對基質要求不嚴,腐殖土、河沙、珍珠巖等基質,成苗率可達98%以上。但蟲害為害嚴重,主要有毛毛蟲、小螺絲、蝸??惺橙~片或幼嫩莖尖,植株慢慢枯死,因而,煉苗時要注意防蟲,或者避開高溫高濕季節(蟲害高發期)煉苗,每年10月至翌年4月是 很佳的煉苗季節。

      編者按:本文作者:高燕、白燕冰、趙云翔,由小編整理發布


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