黃姜(Dioscorea zingiberensis),又名盾狀葉薯蕷,俗名火頭根,薯蕷科薯蕷屬的野生植物,其根狀莖內有高含量的薯蕷皂素,是迄今為止所發現的皂素含量高的植物藥源種之一。皂素是合成甾體類激素藥物的重要原料,具有消炎、避孕、鎮痛、麻醉、殺蟲等功效,在醫藥上應用十分廣泛,其需要量 大。
因為他是雌雄異株,有性繁殖會導致后代性狀發生變異,其無性繁殖可以保持后代性狀的穩定,但年繁殖率僅為3~6倍,且生產中發現了種性退化、皂素含量不穩定、季節性強及用種量大等情況,不能快速推廣黃姜的優良單株或品種。組織培養技術是快速繁殖黃姜優良單株的有效方法,對優良品種能提純復壯和快速育苗。
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材料的選取與接種
從盆栽于室內的(室外的污染極高,須經催芽后選取)生長旺盛的植株上剪下新發出的頂芽或嫩莖段,用中性洗滌劑浸泡,并不斷搖動,然后用自來水沖洗數遍,再用蒸餾水洗2遍后,以0.01%高錳酸鉀滅菌10min,無菌水沖洗1遍;然后在超凈工作臺上用0.1%HgCl2滅菌4min,無菌水洗4遍,以無菌濾紙吸干水后,用剪刀剪成0.5cm的莖段(每段都帶一個芽或頂芽)接種在誘導培養基:MS+6-BA 2.0mg/L+IAA 0.2mg/L上。培養溫度26—28oC,光照10h/d,光照度2000LX。
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誘導與增值
接種在誘導培養基上的外植體,20d以后從原來的腋芽處開始長出1—2個小芽,底部長出褐色愈傷組織。約20d后,新長出的芽長至2-3個葉芽的小苗,底部的愈傷組織長成小球形,成為底部帶愈傷組織的小苗,即可轉入壯苗培養基:MS+NAA 5.0mg/L+6-BA0.5mg/L上培養。也可以把小苗的頂芽剪下繼續接種在誘導培養基上,讓其再誘導芽和愈傷組織??梢詫⒂鷤M織接于MS+KT0.2mg/L+2,4-D 4.0mg/L培養基上,經過40d后長出2-3個芽。半個月以后便長出2-3棵小苗,然后將小苗剪成單株,接在壯苗培養基上培養。
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生根與移栽
壯苗培養基上的苗高3—4cm時轉入生根培養基上,生根培養基以:MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 2.0mg/L為宜,1個月后長出4-5條根。將生根的苗打開封口膜在室內煉苗2—3d,小心取出苗,洗凈培養基栽入沙中,少澆水,但也不能過干。精心管理,成活率可達70%。待根部長出塊莖后再轉入大田栽培。
編者按:本文來自胡孔峰,胡如善,張慎舉主編《植物組織培養技術及應用》,河南科學技術出版社,由小編整理發布,如有不妥,敬請告知!
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